2013年，祝绪丹在中央电视台普法栏目剧《卧底前传之姐妹篇》中首次亮相，饰演了乡村女孩小美一角，从而正式开始自己的演艺生涯；10月，她在网络喜剧《屌丝男士3》中客串内衣店女店员；12月，主演古装音乐微电影《龙潭梦》，并饰演穿越千年的画中人。
2014年4月起，与周铁男等合作主演了“咖啡短剧”系列剧情微电影，其中《晚安陌生人》、《爱神之夜》获第二届亚洲微电影艺术节“金海棠”奖；随后，她还参演了惊悚网络剧《灵魂摆渡2》，饰演少女小鱼；12月，参与拍摄都市情感网络剧《心碎急诊室》，饰演李欣瑶；同年12月起，拍摄古装战争电视剧《英雄诀》，饰演章犀犀；同年，她还参加了湖南娱乐频道主办的星姐选举并获得亚军。
2016年1月8日，祝绪丹作为单元剧女主角出演了民国悬疑电视剧《煮妇神探》，并在“月份牌案件”中饰演了善良单纯、极具正义感的月份牌女郎秋水；2月21日，与刘恺威、郑爽合作出演的清装宫廷爱情剧《寂寞空庭春欲晚》播出，祝绪丹在剧中饰演俏皮可爱的端敏公主。
2017年1月30日，与杨幂、赵又廷合作主演的古装玄幻剧《三生三世十里桃花》首播，她在剧中饰演了白浅的表亲玄女，该剧则以双台平均破一的成绩取得了全国同时段电视剧收视冠军，其全网播放量在播出期间便接近了300亿次，祝绪丹个人也因此得到了更多观众的认可；4月12日，她领衔主演的改编自九夜茴青春三部曲之一的《初恋爱》开机拍摄，祝绪丹在剧中饰演美丽、善良、执着的温静；4月18日，其主演的青春偶像剧《囧女翻身之嗨如花》在优酷视频播出，她在剧中饰演自带笑点、萌点、爆点的“奇葩推销员”鲁如花；随后，祝绪丹还主演了玄幻悬疑网剧《画心师》，并在剧中饰演了外冷内热的画心师岑欢。
2018年2月，祝绪丹出演的都市时尚剧《谈判官》在湖南卫视黄金档播出，她在剧中饰演职场小白兔商碧晨；6月25日，与迪丽热巴、邓伦主演都市爱情剧《一千零一夜》首播，她在剧中饰演了优雅迷人的花艺师周心妍；随后，她还搭档阮经天、王天辰等主演年代传奇情感剧《一身孤注掷温柔》，并在剧中饰演顾婉凝。
2019年1月17日，祝绪丹与侯明昊主演的悬疑探案剧《心宅猎人》开机拍摄，她在剧中饰演了有着双重人格、天真而又傲娇的大小姐元慕青；2月27日，与曾舜晞、陈钰琪领衔主演的古装武侠剧《倚天屠龙记》在腾讯视频播出，起在剧中饰演美丽灵秀、淡雅脱俗，却因爱生恨的峨眉派第四代掌门人周芷若。10月10日，加盟国内首档导演选角真人秀《演员请就位》；10月12日，参加青春体娱跨界类型节目《超新星全运会第二季》。